Descripció del projecte
ANTECEDENTS. La cicatrització és la fase final del procés fisiològic de curació de ferides, que requereix la proliferació cel·lular, la síntesi de matriu extracel·lular i la remodelació tissular per al restabliment estructural i funcional del teixit. Els processos infecciosos i alteracions metabòliques poden alterar el procés de curació i la regeneració tissular, donant lloc a ferides de difícil cicatrització. A més, les persones d’edat avançada presenten una major prevalença de ferides que no cicatritzen adequadament.
Estudis en models murins han demostrat que els teixits amb una elevada regeneració tissular capten més vitamina B12 i metabòlits de la metionina, conduint a una reducció dels nivells sèrics (PMID: 37973897). A més, la suplementació amb vitamina B12 accelera la curació de ferides en un model de colitis ulcerosa. La metionina és un metabòlit essencial en un metabolisme complex, on participen la vitamina B6, B9 i B12 com a cofactors enzimàtics per tal de mantenir els nivells de metionina estables. Els nivells plasmàtics dels metabòlits de la metionina disminueixen amb l’edat (PMID: 33271279), però es desconeix si aquesta reducció s’associa amb l’alteració del procés de cicatrització tissular associat a l’edat.
Les dehiscències de ferides quirúrgiques representen la segona tipologia més freqüent de ferides ateses en pacients adults a l’Atenció Primària, amb una prevalença del 17.5% del total de ferides ateses el 2024 a la província de Lleida. En aquest context, es planteja un estudi observacional prospectiu que inclou el seguiment de persones amb dehiscències de ferides quirúrgiques de diferents edats (a partir de 20 anys) fins a la seva completa cicatrització. L’aplicació de tècniques d’espectrometria de masses aplicades a l’estudi de la metabolòmica permetrà la descripció dels canvis en els nivells dels metabòlits de la metionina i les vitamines B6, B9 i B12 durant la cicatrització de ferides, amb l’objectiu d’entendre l’efecte de l’edat sobre els processos metabòlics, i la descripció de noves dianes terapèutiques per a millorar el tractament d’aquestes persones.
HIPÒTESI. Durant el procés d’envelliment, la reducció dels nivells plasmàtics dels metabòlits del metabolisme de la metionina redueix la seva disponibilitat en les ferides, afavorint l’alentiment del procés de curació.
OBJECTIUS
1. Revisar de l’evidència científica existent sobre el paper dels metabòlits de la metionina i la influència de la vitamina B12, B9 i B6 en humans en els processos moleculars de la cicatrització.
2. Recollir mostres de persones de diferents edats amb dehiscències en diferents fases del procés de cicatrització.
3. Comparar els nivells plasmàtics dels metabòlits en persones amb dehiscències i població sana adulta.
4. Avaluar la correlació entre els nivells de metabòlits plasmàtics i en exsudats.
5. Avaluar els canvis metabolòmics durant el procés de curació.
6. Analitzar l’efecte de l’envelliment sobre canvis metabòlòmics durant el procés de curació.
METODOLOGIA
Obj 1. Es realitzarà una revisió sistemàtica dels mecanismes moleculars implicats en la cicatrització de ferides i la relació amb els metabòlits de la metionina, amb especial atenció sobre la vitamina B12. La revisió es durà a terme seguint les directrius PRISMA 2020. Es definiran les cerques de les revisions sistemàtiques en les bases de dades de PubMed, Cochrane Library, Embase, Scopus, Web of Science i Scielo, emprant paraules claus i connectors booleans. Dos revisors independents avaluaran els títols i resums per aplicar els criteris d’inclusió i exclusió. Els estudis seleccionats es llegiran íntegrament per confirmar-ne la rellevància. Es farà servir la llista de comprovació CASPe per assegurar la qualitat metodològica.
Obj 2. La recollida de mostres es realitzarà des de la Unitat de Ferides Complexes d’Atenció Primària de Lleida, amb la col·laboració de l’Hospital Universitari Arnau de Vilanova (HUAV) i el Biobanc de l’Institut de Recerca Biomèdica (IRB Lleida). La recollida es realitzarà una vegada aconseguida l’aprovació del CEIm de l’HUAV. Els subjectes inclosos a l’estudi seran persones majors de 20 anys amb dehiscències de ferides quirúrgiques que hagin firmat el consentiment informat. El seguiment es realitzarà fins l’alta. De cada persona’obtindran 3 mostres que es corresponen a diferents fases de la cicatrització: inicial, proliferativa i remodelació. Es recollira una mostra d’exsudat i 2 tubs de sang: un per a realitzar una analítica sanguínia (laboratori HUAV) i l’altre per la col·lecció de plasma (Biobanc). Les mostres de plasma i exsudat s’emmagatzemaran a -80ºC fins a la realització dels posteriors anàlisis.
Obj 3-6. Les mostres de plasma i exsudat seran processades per als posteriors anàlisis metabòlòmics. Mitjançant l’ús d’un sistema LC-MS/MS es procedirà a la detecció i quantificació dels metabòlits del metabolisme de la metionina, vitamines (B6, B9, B12), aminoàcids i intermediaris del cicle de Krebs. Es realitzaran anàlisis estadístics univariants i multivariants utilitzant els softwares SPSS, Metaboanalyst i RStudio.
